Artemisia artemisinina, estrazione, malaria CONTENUTI IN ARTEMISIA ANNUA L ESTRATTI RICEVUTI DA METODI DIVERSI

CONTENUTI DI ARTEMIZININ IN ARTEMISIA ANNUA L ESTRATTI OTTENUTI DA METODI DIVERSI Soktoeva, G.L. Ryzhov, K.A. Dychko, V.V. Khasanov, SV Zhshzhitzhapova, LD Padnaeed Buryat State University, st. 24a Smolina, Ulan-Ude (Russia) Tomsk State University, 36 Lenina Ave., Tomsk (Russia) Baikal Institute for Nature Management, filiale siberiana dell'Accademia Russa delle Scienze, ul. Sakhyanova, 8, Ulan-Ude (Russia)

Vengono esaminate le domande sull'isolamento dell'artemisinina da Artemisia annua L. e sulla sua determinazione quantitativa utilizzando il metodo HPLC-MS. L'artemisinina è stata isolata con vari metodi di estrazione: macerazione, ecografia e estrazione subcritica di CO2. La composizione componente degli estratti di CO2 ed esano è stata studiata da GC-MS.

introduzione

L'artemisinina (1) è un perossido sesquiterpene [1], che è un farmaco antimalarico altamente efficace e un precursore di composti più potenti, come l'artemetere, l'artesunato e alcuni altri. L'importanza dell'artemisinina e dei suoi derivati si basa sull'azione molto rapida di un composto di questo tipo contro il suo principale patogeno Plazmodium falciparum, che causa anche una malattia al cervello. La sintesi chimica e biochimica dell'artemisinina si è dimostrata molto costosa e, quindi, attualmente non redditizia quale principale fonte di produzione di artemisinina [2].

La malaria è causata da un microrganismo - la malaria da Plasmodium. Esistono 4 tipi di tale plasmodio, parassita nel corpo umano: Plazmodium vivax, P. ovale, P. malariae e P. falciparum. A metà del XX secolo, grazie all'uso diffuso del chinino e dei suoi derivati, è stato possibile ridurre significativamente il numero di pazienti affetti da malaria. Tuttavia, dagli anni '60. il secolo scorso la malaria ha di nuovo ricordato a se stessa. Ciò era dovuto al fatto che in Tailandia e Sud America la malaria Plasmodium (P. falciparum), resistente a chinino, clorochina, meflochina e altri farmaci a base di chinolina, appariva e si diffondeva in altre regioni [3, 4]. Il problema di trovare nuovi farmaci antimalarici efficaci, tra cui è stata proposta l'artemisinina, è diventato di attualità. Questo composto unico è stato scoperto in Cina (il nome cinese è qinghaosu). I lavori furono iniziati nel 1967 e furono chiamati "Programma 523" [5]. È isolato dall'assenzio annuale annuale di Atemisia annua L., che è distribuito nel territorio dell'ex Unione Sovietica, coprendo le aree di Altai, Transbaikalia, Regione di Amur, Kazakistan, Kirghizistan, Uzbekistan e Turkmenistan. Wormwood è ampiamente rappresentata in Cina e in altri paesi [6]. La quantità totale di artemisinina isolata da diverse parti di A. annua è di circa 0,01 e 1,4% della massa fogliare secca [2].

Artemisia annua L. è la principale materia prima per la produzione di artemisina. L'Organizzazione Mondiale della Sanità nel 2001 raccomandò l'uso di artemisinina nella terapia di prima linea per il controllo della malaria, che portò ad un aumento dell'area sotto l'assenzio di un anno. Per lo più, l'assenzio viene coltivato annualmente in Asia orientale, principalmente in Cina e Vietnam (il 70% delle superfici del patrimonio mondiale), introdotto recentemente in cultura nell'Africa orientale e meridionale (20% della superficie del patrimonio mondiale), che fornisce un quarto delle esigenze sanitarie globali [7].
Oltre all'artemisinina, l'annua è apprezzata per il suo olio essenziale, che ha un caratteristico aroma dolce ed erbaceo e viene usato in profumeria e prodotti cosmetici. Inoltre, l'olio ha proprietà antibatteriche e può essere usato per trattare le malattie della pelle. Oltre ai lattoni sesquiterpenici, che hanno il principale valore terapeutico, gli oli essenziali di questa pianta contengono una quantità significativa di componenti che hanno un valore, come l'1,8-cineoleum, l'alcol di artemisia e il chetone, il borneolo e altri. ha anche analizzato l'effetto fisiologico degli estratti lipofili sulla pelle [2].
In connessione con la composizione ricca e diversificata di sostanze biologicamente attive contenute in Artemisia annua, la ricerca di nuove aree di crescita di assenzio annuale è di grande interesse. Nella Repubblica di Buriazia, crescono 46 specie di polynum [8], compresa l'Artemisia annua L. Il contenuto di artemisinina in Polonia, di un anno, cresciuto in Buriazia, non è stato studiato in precedenza. Pertanto, lo scopo di questo lavoro era la determinazione quantitativa dell'artemisinina in estratti ottenuti con vari metodi di estrazione.

Parte sperimentale

La materia prima per lo studio è stata selezionata nella parte fuori terra dell'annuale annua polacca Artemisia annua L., raccolta nella prima decade di agosto 2010, nella fase di fioritura.
L'isolamento di artemisinina e di altre sostanze biologicamente attive (olio essenziale) è stato effettuato utilizzando vari metodi di estrazione: macerazione, estrazione ultrasonica e estrazione subcritica di CO2. L'estrazione è stata effettuata su installazioni di laboratorio. Esano, etilacetato, etanolo e CO2 sono stati utilizzati come estrattori. I dati e i parametri di estrazione sono mostrati nella Tabella 1. Estratti dal precipitato sono stati separati mediante centrifugazione in una centrifuga OP-8UHL4.2 a 5000 rpm e quindi filtrati attraverso un sistema di filtrazione del campione.
La quantificazione dell'artemisina è stata determinata mediante HPLC-MS utilizzando un cromatografo liquido ad alte prestazioni Finnigan Surveyor dotato di un autocampionatore Plus autocampionatore e una pompa LC Plus Plus con un rilevatore Finnigan LCn Advantage MAX (trappola ionica), metodo di ionizzazione - electrospray. Colonna "Hypersyl Gold" 150 × 4 mm, riempita con gel di silice sorbente con fasi innestate C18 (granulometria 5 μm), (prodotto da Thermo electronic corporation, USA). L'eluizione è stata effettuata in modalità isocratica (50% (A): 50% (B)), la composizione del tampone di partenza (A) era una soluzione acquosa di acido formico, (pH = 3) + 2 ml di una soluzione satura di acetato di ammonio, tampone di eluizione (B) - 100% acetonitrile. La portata volumetrica dell'eluente è 0,5 ml / min, il volume del campione iniettato (campionatore automatico) è 25 μl. La registrazione degli ioni è stata effettuata nella modalità di monitoraggio degli ioni caricati positivamente (Selected Ion Monitoring, SIM), con una massa molecolare di 300 (dovuta all'aggiunta di ione ammonio NH4 alla molecola di artemisinina) con una larghezza della finestra (299-301) m / z. La determinazione quantitativa è stata eseguita utilizzando il metodo standard interno utilizzando il campione standard statale di Sigma.

Metodi di estrazione e parametri

No. p / p Metodo di estrazione Estrattore Parametri di tempo / estrazione dell'estrazione Contenuto di artemisinina in%, in termini di a.s.s.
1 Macerazione di etanolo 24 h / materie prime: rapporto solvente (1: 5) 0,040 ± 0,002
2 Macerazione etanolo 48 h / materie prime: rapporto solvente (1: 5) 0,038 ± 0,002
3 Macerazione di esano 24 h / rapporto del campione: solvente (1: 5) 0,039 ± 0,002
4 Estrazione ad ultrasuoni etanolo 15 min / rapporto delle materie prime: solvente (1: 5), frequenza del suono 50 Hz, T = 25 ° C 0,039 ± 0,002
5 Estrazione ad ultrasuoni acetato di etile 15 min / materie prime: rapporto solvente (1: 5), frequenza del suono 50 Hz, T = 25 ° C 0,022 ± 0,001
6 CO2-estrazione so2 24 h / portata 30 l / h, T = 20-22 ° C, P = 6,0-6,2 MPa 0,054 ± 0,003

Inoltre, i componenti volatili degli estratti di CO2 ed esano sono stati studiati mediante cromatografia-spettrometria di massa su un gascromatografo Agilent Packard HP 6890 con un rivelatore a quadrupolo MSD 5973N. Abbiamo usato una colonna di quarzo da 30 metri TR-5 ms con un diametro interno di d = 0,25 mm, uno spessore del film di 0,25 μm. La separazione cromatografica è stata eseguita come descritto in [9]. Qualitativamente, i componenti degli estratti sono stati determinati confrontando gli spettri di massa completi con i dati della libreria di dati spettrometrici di massa della cromatografia di sostanze volatili di origine vegetale A.V. Tkachev, librerie NIST 08 e Wiley 275. I risultati dell'analisi sono presentati nella tabella 2.

I componenti principali degli estratti di CO2 ed esano
Parente area relativa Connections Area relativa relativa
Composti di estratto di esano estratto di CO2
Estratto di CO2 Estratto di esano
Idrocarburi a catena lunga di Monoterpenoidi
Triciceno 140181 - Tricosano 103969 52288
a-pinene 1155320 - Tricozen-1 1956324 -
Camphene 2021028 - n-Pentacosane 534763 110485
R-pinen 371548 1683858 645634 - - -
n-eptacosano 279800 132358
3-carene

Idrocarburi ciclici
limonene
Pentacyclo 576196 -
R-phellandren 587143 - [7.5.0.0 (2.8).0 (5.14) 0.
1,8-cineole 133599 - (7,11)] tetradecano
Artemisia chetone 1413437 - 1,8-dimethylphenanthrene 3765681 1080289
Borneol 170158 707945 - - Flyuoren 3507465 319501
Acetato di Bornyl

diterpenoidi
sesquiterpenoidi
Methyl 3,5-bis (etilamino) benzoato 627581 283913
Cariofillen 370714 214560 - -

Ossido di cariofillina
Germacren D 214913 -
R-Selinene 3053333 328535
a-cadinol 149485 -

Discussione dei risultati

Come si può vedere dai dati presentati nella tabella 1, la resa più bassa di artemisinina era (0,022%) con estrazione ultrasonica con etil acetato. Il contenuto di artemisinina in estratti isolati mediante estrazione a ultrasuoni e macerazione con diversi solventi (esano, alcool etilico) non è significativamente diverso 0,038-0,040% in termini di A. p. Quando si insiste con l'etil-etilico annegato per 24 e 48 ore, il contenuto di artemisinina negli estratti ottenuti è approssimativamente lo stesso di 0,040 e 0,038%, rispettivamente. La massima resa di artemisinina (0,054%) è stata ottenuta durante l'estrazione pre-critica di CO2. Per confronto, presentiamo alcuni dati sul contenuto di artemisinina, in un assenzio di un anno, che cresce in vari territori. Artemisia annua L., che cresce in varie parti della Cina, contiene da 0,01 a 0,22% di artemisinina. Alcuni ibridi di assenzio annuale coltivati in Cina e Vietnam contengono da 1,0 a 1,5% di artemisina [10]. Il contenuto di artemisinina in A. annua, che cresce sul territorio dell'ex URSS, è il seguente (i valori sono dati in termini di materie prime secche): SSR georgiano (0,005%), SSR kirghiso (0,025%), SSR moldavo (0,01-0,02%), Territorio di Krasnodar (0,04%), SSR ucraino (0,005-0,05%), Turkmenistan (0,05% in termini di a.s.c.), Kazakistan (0,01-0,05% in termini di A.S.S.) [11].
Nello studio della composizione degli estratti di assenzio annuale, ottenuti mediante estrazione con CO2 e macerazione, quando l'esano è stato usato come estrattore, la spettrometria di massa per cromatografia ha rivelato differenze significative nella composizione di questi estratti. Monoterpenoidi, sesquiterpenoidi, idrocarburi a catena lunga, idrocarburi ciclici e diterpenoidi sono rilevati dal metodo della spettrometria di massa.
I monoterpenoidi si trovano solo nell'estratto di CO2. I componenti principali dell'estratto di CO2 sono a-pinene, 3-caren, artemisia chetone, (3-selenene, tricozen-1, 1,8-dimethylphenanthrene e fluorene.

Nell'estratto esano di assenzio mediante gascromatografia annuale-spettrometria di massa, sono stati identificati principalmente idrocarburi a catena lunga e idrocarburi ciclici, il 3-selenene è stato rilevato dai sesquiterpenoidi.
Oltre all'artemisinina, che è di valore medicinale primario, l'olio essenziale contiene un gran numero di componenti di valore biologico, come artemisia chetone, 1,8-cyneol, borneolo, ecc.

risultati

1. Il contenuto di artemisinina in vari estratti di A. annua (parte aerea, fase di fioritura) che cresceva sul territorio della Repubblica di Buriazia era determinato da HPLC-MS.
2. Il contenuto massimo di artemisinina si trova nell'estratto di CO2 (0,054% in termini di a.s.c.),
3. Con l'aiuto della spettrometria di massa per cromatografia, è stata studiata la composizione dell'olio essenziale estratto con vari metodi di estrazione.

Artemisia annua L.
Descrizione del Taxon

Nomi russi

tassonomia

immagine

Piante sulla mappa

Descrizione botanica

Artemisia annua L. Sp. pl. (1753) 847; Bess. in Nouv. Mem. Soc. Nat. Mosc. III, 81; Dc. Prodr. VI, 119; Ldb. Fl. Ross. II, 592; Boiss. Fl. o. III, 371; Maxim. in Bull. Acad. Sc. Petersb. Viii, 528; Hook. Fl. Br. Ind. III, 323; Com. in fl. Manchu. III, 659; Nakai, Fl. Coreano. II, 30; Fedch. Adyge. sol. Turk. IV, 200; Rydb. Nord Am. Fl. 34, parte 3, 259; Pampan. in Nuov. Giorn. Bot. Ital. n.s. XXXIV, 637; Hall e Clem. Artem (1923) 102; Com. e Alice. Res. sol. Estremo Oriente kr. II, 1036; Krasheniny. in fl. a sud-est. Europ. Parte URSS, VI, 357; Grossg. Fl. Kavko. IV, 138; Krasheniny. e ali. Fl. Zap. Sib. XI, 2816; Polyak. in Mayevsky, FL. 586. - A. chamomila Winkl. in Tr. Università Pietroburgo. Bot. Giardino, X, 87; Fedch. op. Op. - Ic.: Amm. Stirp. rar. t. 193, f. 23; Gmel. Fl. sib. II tab. 25. - Ex.: ГРФ № 3152. - Un anno di Assenzio.

Annuale. La pianta è fragrante, verde, spoglia o con peli dispersi, piccoli, adiacenti, con stelo diritto, a coste, marrone o viola-bruno, alto 30-100 cm.; le foglie sono punteggiate-fossa-ferruginose, picciolate inferiori, lunghe 3-5 cm. e 2-4 cm di larghezza., ovale, tre volte pinnacolare, segmenti dell'ultimo ordine oblungo-lobato, a punta corta; intero o con 1-2 denti, 1-2 mm di lunghezza. e 0,5 mm di larghezza; le foglie mediane e staminali sono doppie pennate, sessili superiori, più piccole e meno complesse, le brattee più alte sono semplici o con un piccolo numero di lobuli laterali. I canestri sono sferici, larghi 2-2,5 mm, numerosi, rigettati o pendenti, su zampe corte, raccolti insieme su rami corti, in b. m lunghezza, infiorescenza a pannocchia piramidale; l'involucro è liscio, le foglioline esterne sono linearmente oblunghe, verdi, ovali interne o quasi rotonde, con un bordo lucido a bordi larghi attorno al bordo; recipiente convesso, nudo; fiori marginali pistillati, 10-20 in numero, corona filiforme, punto-ghiandolare, strettamente lineare, lobi dello stigma, ottusi, esposti da un tubo; i fiori del disco sono bisessuali, di numero 12-30, tubolari a cappuccio stretto, nudi; antere strettamente lineari, appendice superiore allungata, ad angolo acuto, lobi basali molto corti, appuntiti; la colonna è più corta degli stami, lo stigma dello stigma è lineare, dritto, leggermente deviato, ciliato all'apice; acheni lunghi 0,8-0,6 mm., oblungo-ovato, piatto, all'apice con una piccola piattaforma arrotondata, appena bordato lungo il margine. Col. VIII - IX.

Nei luoghi erbosi vicino a case, giardini, giardini. - Europa. h.: Upper Dniester., Upper Dnieper., Volzh. Don., Volga., Lower. Don., Black., Bess., Crimea; Caucaso: Zap.- e Oriente. Trans., Tal., Mer. Asia: Aral-Casp., Balkh., J.-Tarb., Tien-Shan., Syr-Dar., Pam. - Al., Amu-Dar., Corno. Turkmeno. Tot. var.: mer Ebr., Srediz., Balk. -Maloaz., Arm.-Kurd., Iran, J.-Kashg., Kit., Jap., Mongolia, Nord. America (aliena).

Il tipo di vista è i disegni di Amman e Gmelin.

Famiglie. VAL. La resa di olio essenziale è 0,1-0,64% (secondo Goryaev). Secondo Joshikazu Imade (1937), il cineolo e la sostanza C10H6O sono nell'olio; questa sostanza è stata studiata in dettaglio da Ashania e Joshitomi (1917); insieme con artemacyaketon, il suo isomero, isoartemisieacetone, è stato trovato nell'olio. Questo chetone è stato in grado di isolare dal liquore madre rimanente nella preparazione di aricacyacetone semicarbosone. Seisi Takagi (1928), continuando lo studio del giapponese A. annua, ai 4 componenti noti nell'olio ne aggiunsero altri 2 nuovi: il cadinene e il cariofillino. Sulla base di studi Rutovskogo e Vinogradov (1929), olio composto α-pinene, cineolo, canfene, e artemiziaketona izoartemiziaketona, una piccola quantità di borneolo, acetico e acido butirrico, kimunovogo aldeide (presumibilmente semikarbozon) e fenolo (probabilmente eugenolo). Una piccola quantità di alcaloidi fu trovata nelle parti sotterranee (Lazurievsky, Sadykov, 1939, Massagetov, 1947). Secondo le osservazioni sul campo (Yunatov, 1954), nello stato verde non si mangia il bestiame. La presenza di alcaloidi è confermata da M.I. Goryaeva, G.K. Kruglykhina, E.I. Satdarova (1959).

Abstract e tesi sulla medicina (14/04/02) sul tema: Studio farmacognostico di Artemisia annua L. e Artemisia sieversiana Willd. flora della Buriazia

Abstract della tesi di laurea in medicina sull'argomento Studio farmacognostico di Artemisia annua L. e Artemisia sieversiana Willd. flora della Buriazia

Come un manoscritto

Soktoeva Tuyana Erdemovna

RICERCA FARMACOGOSTALE ARTEMISIA ANNUA L. E ARTEMISIA SIEVERSIANA WILLD. FLYORS OF BURYATIA

14/04/02 - chimica farmaceutica, farmacognosia

Estratto di tesi per il grado di candidato di scienze farmaceutiche

Il lavoro di dissertazione è stato condotto presso l'istituto statale per la formazione professionale di istruzione superiore "Buryat State University" del Ministero dell'Istruzione e della Scienza della Federazione Russa e la fondazione dell'Accademia delle scienze russa dell'Istituto Baikal di gestione ambientale, ramo siberiano dell'Accademia delle scienze russa

Supervisore: dottore in scienze chimiche, professore

Radnaeva Larisa Dorzhievna

Opposti ufficiali: Dottore in Scienze Biologiche, Professore

Antsupova Tatyana Petrovna

Candidato di Scienze farmaceutiche Mongolov Hanhai Purbuevich

Organizzazione leader: Perm State

Ministero della Salute e dello Sviluppo Sociale della Federazione Russa

Protezione si terrà "23" nel dicembre 2011 a 10 °° ore in una riunione del Consiglio tesi DM 003.028.02 presso l'Istituto di Biologia Sperimentale Generale e SB RAS a: 670.047, Ulan-Ude, ul.Sahyanovoy 6.

La tesi è disponibile presso la Biblioteca scientifica centrale del Centro scientifico Buryat dello SB RAS.

L'abstract pubblicato il 22 novembre 2011.

Segretario scientifico del Candidato di scienze biologiche del Consiglio di dissertazione

DESCRIZIONE GENERALE DEL LAVORO Rilevanza dell'argomento. Piante genere Artemisia (Artemisia) -perspektivnye fonti di sostanze biologicamente attive, specie come dragoncello Artemisia dracunculus L., artemisia Artemisia absinthium L., Artemisia vulgaris L. Artemisia vulgaris ampiamente utilizzati nei tradizionali olistica industrie, medicina e alimentare. L'Artemisia annua L., un assenzio annuale, è stata introdotta con successo in coltura in molti paesi e nel 2001 è stata raccomandata dall'OMS come la principale fonte di artemisinina, il trattamento di prima linea per la malaria. Oggi, i paesi produttori di artemisina forniscono circa un quarto dei bisogni sanitari globali (Tolstikova, 2010; Xiao Wang, 2011). 137 composti biologicamente attivi sono stati isolati dal bambino di un anno, inclusi 40 sesquiterpeni, 10 triterpeni, 7 cumarine, 46 flavonoidi, che possono servire come base per lo sviluppo di farmaci (Bhakuni, 2001). Negli anni '80 del XX secolo, un gruppo di scienziati (Schroeter, 1989) tentò di coltivare la sezione a crescita spontanea della flora un anno dell'URSS nella CISA (Mosca). Al giorno d'oggi, importanti lavori per l'introduzione del primo anno sono effettuati presso la Tomsk State University. In Buriazia, l'annuale è una specie a crescita spontanea.

Insieme con il parassita annuale in Buriazia, Artemisia sieversiana Willd assomiglia all'assassinio di Siver. È diffuso, che è anche una specie promettente. L'erba di Seabera contiene flavonoidi, olio essenziale, cumarine (Tkachev, 2002; Shatar, 1998; Hanina, 1999; Suleimenov, 2009). L'olio essenziale di Sivers è interessante come fonte di camazulene, un composto non tossico con effetti anti-infiammatori, battericidi e rigenerativi (Berezovskaya, 1991; Khanina, 1992).

Fino ad ora, uno studio chimico dettagliato sull'ossigeno e l'assenzio della Siver della flora annuale della Buriazia non è stato realizzato come promettenti fonti di sostanze biologicamente attive, pertanto il loro studio è un compito urgente.

Obiettivo: Studio farmacognostico sull'assenzio Siver Artemisia sieversiana Willd. e l'Artemisia annua L. annua come preziose fonti di sostanze biologicamente attive.

Per raggiungere questo obiettivo è necessario risolvere i seguenti compiti:

1. Identificare i segni anatomici e diagnostici della parte aerea di Sivers e P. di un anno, per stabilire indicatori di merchandising

materie prime, valutazione delle riserve e possibilità di raccolta per un anno e p. Siversa nel territorio della Repubblica di Buriazia;

2. Studiare la composizione chimica dei principali gruppi di sostanze biologicamente attive di queste piante e determinare il loro contenuto quantitativo, stabilire la localizzazione di oli essenziali e artemisinina in singole parti delle piante, studiare le dinamiche del loro accumulo nelle fasi di sviluppo e determinare le condizioni ottimali di raccolta;

3. Sviluppare un metodo per la determinazione quantitativa dell'artemisinina nella parte aerea del bambino di un anno;

4. Determinare gli indicatori di qualità e gli standard per il contenuto di sostanze biologicamente attive di base, per sviluppare la documentazione normativa per le materie prime medicinali - l'erba di assenzio Siver e l'erba di assenzio di un anno.

Novità scientifica Sono state stabilite le principali caratteristiche diagnostiche dell'erba di Sivers e P. annuale, sono stati sviluppati gli indicatori numerici necessari per la standardizzazione delle materie prime.

È stato condotto uno studio sulla composizione chimica dell'erba dei Siver e dell'erba di un anno. È stato determinato il contenuto di oli essenziali, flavonoidi, acidi grassi, macro e microelementi. Flavonoidi - luteolina-7-glucoside, rutina, quercetina e chryoeriolo sono stati rilevati con il metodo HPLC-MS in queste piante. I principali acidi grassi nei tipi studiati di assenzio sono palmitici, linoleici, linolenici, il 10% di acido ottadekenico si trova anche in assenzio significativo.

Sono state determinate le condizioni per l'estrazione di artemisinina (tipo di estratto, metodo di estrazione, tempo di estrazione) dall'erba annuale e si è stabilito che l'estrazione massima di artemisinina è ottenuta mediante estrazione di CO2 ultrasonica e subcritica. Con HPLC-MS è stato stabilito che la maggior quantità di artemisinina nel bambino di un anno è contenuta nella fase di fioritura nelle infiorescenze.

Studiato le dinamiche di accumulo di olio essenziale, a seconda della fase di sviluppo e parte della pianta. La maggior quantità di olio essenziale di Chamazulene P. Siversa si accumula nelle fasi di germogliamento e fioritura nelle infiorescenze.

Gli indicatori di qualità stabiliti di BAS inclusi nei documenti normativi.

Significato pratico. Le riserve e il possibile volume annuale di approvvigionamento di un insediamento di Siver e un insediamento di un anno nel territorio della Repubblica di Buriazia (insediamento di Sivers - da 0,1 a 73,7 tonnellate all'anno, e un insediamento di un anno - da 1,2 a 122,3 tonnellate all'anno).

Una tecnica è stata sviluppata per la determinazione quantitativa dell'artemisinina in erba P. mediante un metodo HPLC-MS annuale. Le condizioni per la preparazione del campione di materie prime per l'analisi per la determinazione quantitativa dell'artemisinina sono scientificamente documentate.

La standardizzazione delle materie prime è stata effettuata, i progetti FS sono stati sviluppati - "Sivers Wormwood Herbal" e "Wormwood One-Year Grass".

Il grado di implementazione. Il metodo di estrazione dell'olio essenziale e dei dati di analisi microscopica sono stati testati e introdotti nel processo educativo del Dipartimento di Farmacia presso l'Istituto statale per la formazione professionale di istruzione superiore "Buryat State University" (Attuazione n. 1 del 6 settembre 2011). I progetti di FS sull'erba degli assenzio Sivers e l'assenzio di un anno sono preparati per essere presi in considerazione.

Per la difesa sono presi:

• i risultati dello studio della struttura anatomica, delle scorte, dei criteri di autenticità di Sivers e di P., in crescita in Buriazia;

• risultati di uno studio chimico di sostanze biologicamente attive e della loro dinamica stagionale dell'accumulo;

• risultati di studi sulla standardizzazione della parte fuori terra di Sivers p. E p. Un anno.

Approo di lavoro. Le principali disposizioni della tesi sono state presentate e discusse in: una conferenza scientifico-pratica con partecipazione internazionale "Lo sviluppo della medicina tradizionale in Russia: esperienza, ricerca, prospettive" (Ulan-Ude, 2010); 7th Winter Simposium on Chemometrics "Metodi moderni di analisi dei dati" (Saint-Petersburg, 2010); la conferenza scientifica internazionale dedicata al 15 ° anniversario dell'Università statale di Buryat "Studi reali sull'Asia del Baikal" (Ulan-Ude, 2010); V conferenza scientifica-pratica internazionale "Priorità e caratteristiche dello sviluppo della regione del Baikal" (Ulan-Ude, 2011); X conferenza scientifica-pratica internazionale "Problemi di botanica della Siberia meridionale e della Mongolia" (Barnaul, 2011); IV Conferenza tutta russa "Nuovi progressi nella chimica e nella tecnologia chimica dei materiali vegetali" (Barnaul, 2009); XVI Conferenza internazionale di studenti, laureati e giovani scienziati "Lomonosov-2009" (Mosca, 2009); XV Conferenza internazionale degli studenti di ecologia "Ecologia della Russia e territori adiacenti" (Novosibirsk, 2010); II Conferenza scientifica-pratica interamente russa di studenti, dottorandi e giovani scienziati "Tecnologie e attrezzature dell'industria chimica, biotecnologica e alimentare" (Biysk, 2009); Conferenza scientifica-pratica tutta russa "Vegetazione

La regione del Baikal e territori adiacenti "(Ulan-Ude, 2011); V Seminario scolastico dei giovani scienziati della Russia "Problemi di sviluppo sostenibile della regione" (Ulan-Ude, 2009); la conferenza scientifica-pratica giovanile regionale con partecipazione internazionale "Tecnologie e materiali rispettosi dell'ambiente e delle risorse" (Ulan-Ude, 2010).

Il lavoro è stato svolto nell'ambito di progetti di ricerca: RFBR: 08-04-90202-Mong_a "Studio dei modelli biogenetici della biosintesi di composti biologicamente attivi di piante endemiche dell'Asia centrale" (2008-2009), 08-04-98037-r_sibir_a "Composizione chimica delle piante come indicatore lo stato degli ecosistemi della regione del Baikal "(2008-20 Yugg,); progetto di integrazione interdisciplinare n. 93 "Sviluppo della ricerca nel campo della chimica medica e della farmacologia come base scientifica per lo sviluppo di farmaci domestici"; un progetto congiunto con l'Accademia delle scienze della Mongolia "Ottenere nuove forme lipo-e nanosomiali di droghe usando materie prime naturali"; RFBR: 10-03-16001-mob_ros "Mobilità di giovani scienziati" (2010), 11-03-90705-mob_st lavoro scientifico (formazione) di giovani scienziati russi nelle principali organizzazioni scientifiche della Federazione Russa 2011 (2011).

Pubblicazioni. Secondo i risultati, sono stati pubblicati 17 lavori scientifici, di cui 3 pubblicati su periodici raccomandati dalla Commissione di attestazione superiore del Ministero della Difesa e della Scienza della Federazione Russa.

Lo scopo e la struttura della tesi. Il lavoro di tesi è presentato su 172 pagine di testo dattiloscritto e consiste in introduzione, revisione della letteratura (1 capitolo), parte sperimentale (4 capitoli), conclusioni generali, elenco di riferimenti e applicazioni. Il lavoro è illustrato con 37 tabelle e 61 figure. L'indice bibliografico comprende 139 fonti, tra cui 42 straniere.

Nell'introduzione, la rilevanza dell'argomento è motivata, vengono formulati lo scopo e gli obiettivi della ricerca, vengono presentate la novità scientifica e il significato pratico del lavoro.

Il primo capitolo (revisione della letteratura) presenta dati sulla composizione chimica, lo spettro dell'attività farmacologica, l'uso del genere Artemisia L. nella pratica medica tradizionale e moderna.

Il secondo capitolo (materiali e metodi) presenta i dati sugli oggetti di studio, i metodi utilizzati, i dispositivi e i reagenti, altre informazioni metodologiche.

Il terzo e il quarto capitolo forniscono dati sullo studio dei segni anatomici e diagnostici di Severs S e di un anno. Per metodo

La spettrofotometria UV ha determinato il contenuto totale di flavonoidi e tannini negli oggetti di studio. Con l'aiuto di GC-MS, è stata studiata la composizione qualitativa e quantitativa di olio essenziale e acidi grassi di assenzio. Il metodo HPLC-MS ha stabilito il contenuto qualitativo e quantitativo dei flavonoidi. La composizione elementale delle piante è stata determinata dal metodo AAS. Una tecnica per quantificare il contenuto di artemisinina è stata sviluppata e proposta. da HPLC-MS. Inoltre, abbiamo studiato le composizioni chimiche degli oli essenziali dei cinque tipi di polynya che si trovano più comunemente sul territorio della Buriazia e della Mongolia - il Gmelin Artemisia gmelinii Web wormwood. et Stechm., assenzio, grigio Artemisia glauca Pall, ex Wild., assenzio, Artemisia macrocephala a grossa cresta Jacq. ex Bess., Sievers assenzio Artemisia sieversiana Willd. e Artemisia annua L.

Il quinto capitolo fornisce dati sulla standardizzazione dell'erba di Sivers e P. del bambino di un anno, proposti come promettenti fonti di camazulene e artemisinina, rispettivamente.

Il contenuto principale del lavoro

Oggetti e metodi di ricerca. Gli oggetti dello studio erano campioni di erba provenienti da Sivers e villaggi annuali raccolti in vari distretti della Repubblica di Buriazia (Ivolginsky, Pribaikalsky, Selenginsky, Tunkinsky, Zakamensky, Kurumkansky) della Regione di Irkutsk (isola di Olkhon) e Mongolia (Selenginsky Aimak) nel periodo dal 2008 fino al 2011

L'analisi microscopica è stata eseguita in accordo con l'articolo "Tecnica dell'analisi microscopica" (GF XI, numero 2) su microscopi Mikmed (Lomo, Russia) con un oculare 10x; obiettivi 4x, 10x, 40x e MS-300 (TFXS), set di sistemi fluorescenti (Micros, Austria) con un oculare 10x; obiettivi 4x, 10x, 40x. Il rendimento delle materie prime è stato determinato dal metodo dei siti contabili.

L'estrazione dell'olio essenziale è stata effettuata mediante idrodistillazione, gli estratti sono stati ottenuti mediante estrazione ultrasonica, estrazione di CO2 e macerazione.

Lo studio della composizione qualitativa e quantitativa di questi oggetti è stato effettuato con i seguenti metodi: GC-MS, HPLC-MS, TLC, BC, spettrofotometria UV e AAS. L'analisi spettrometrica di massa cromatata è stata eseguita su un gascromatografo Agilent 6890 con uno spettrometro di massa quadrupolo HP MSD 5973N (Agilent Technologies, USA, colonne: HP-5ms, g = 0,25 mm, spessore del film 0,25 μm (copolimero - 5%, difenile - 95% dimetilsilossano) e DBWax con diametro interno di 0,25 μm, gas di trasporto - elio, g) portata 1-1,5 ml / min; L'analisi HPLC-MS è stata eseguita su cromatografi liquidi ad alte prestazioni Finnigan Surveyor (Thermo Scientific, USA) e Agilent 1200 (Agilent Technologies,

USA) con rilevatore di massa selettivo "LCQ Advantage MAX" ("trappola ionica") del marchio "Finnigan" (Thermo Scientific, USA) e con un rilevatore spettrometrico di massa in tandem ("trappola ionica") 6330 (Agilent Technologies, USA), metodo elettrospray di ionizzazione; condizioni: Hypersyl Gold Cl8, 5 micron, colonne 150x4 mm (Thermo electronic corporation, USA) e Zorbax Eclipse C18, 5 micron, 4.6 * 150 mm (Agilent Technologies, USA), portata eluente 0,5 ml / min. L'analisi TLC è stata eseguita su lastre Sorbfil PTSH-P-A-UV (Imid Ltd, Russia); L'analisi BC è stata eseguita su carta FN 6 (Filtrak, Germania); Gli spettri di assorbimento sono stati registrati su uno spettrometro StellarNet Green Waiv (StellarNet Inc, USA), l'analisi AAC è stata eseguita su uno spettrofotometro SOLAAR MB (Thermo Scientific, USA) e sul modello Varían AA240 (Varian, Russia).

L'elaborazione statistica dei dati sperimentali è stata eseguita con il metodo dell'analisi statistica delle variazioni. Parte dei dati è stata elaborata da CIM (pacchetto software Sirius versione 6.0, Pattern Recognition Systems, a / s, Norvegia).

Caratteristiche farmacognostiche dell'erba di P. Sivers e P. dell'estate. I seguenti indicatori della qualità delle materie prime medicinali. Assenzio. Intere materie prime Cime solide o parzialmente frondose di fusti fioriferi lunghi non più di 45 cm, che non contengono parti grossolane del gambo. Stelo pubescente, dritto, nervato e ramificato. Le foglie radicali e mediane sono picciolate, largamente triangolari, tre volte pennate, fette piatte oblunghe, lunghe 1,4 - 2,5 cm, larghe 0,1 - 0,5 cm. Canali emisferici, 0,4 - 0,6 cm di diametro, larghi infiorescenza paniculata. Fiori di bordo pistillo (ce ne sono circa 18). Fiori bisessuali, numerosi, con una corolla a forma di imbuto.

Assenzio annuale di erba. Intere materie prime Cime solide o parzialmente frondose di fusti fioriferi lunghi non più di 50 cm, non contenenti parti grossolane dello stelo. Il fusto è nudo, dritto, solcato, verde all'inizio della stagione di crescita, viola scuro alla fine. La foglia delle foglie del gambo medio e inferiore è ovoidale o ovale, lunga 1,5-7,0 cm sul picciolo, di lunghezza ellittica, senza ali, tre volte sovraespressa in ampi segmenti, segmenti e segmenti, lunghi da 0,5 a 0,8 cm, non larghi più di 0,2 cm Cestini con diametro di circa 0,2 cm in infiorescenza paniculata.

Nel condurre uno studio anatomico sull'erba di P. Sivers e P. a un anno, sono stati identificati numerosi aspetti anatomici e diagnostici. La struttura delle foglie di assenzio è presentata nella Tabella 1. Il peduncolo del Siver è un assenzio, le cellule dell'epidermide allungate.

Ci sono ghiandole dell'olio essenziale, peli a forma di T e cellule stomatiche arrotondate. Lo stelo ha un tipo di struttura a travi. Nelle costole ci sono aree del magro. Fasci di Collanteral disposti in un cerchio sono caratterizzati da uno sclerenchima fortemente sviluppato. Endoderma ben marcato, costituito da grandi cellule a parete sottile di forma rotonda, strettamente adiacenti l'una all'altra.

Caratteristiche della struttura anatomica delle foglie di P. Sivers e P. Un anno __

Annuale di wormwood epidermide assenzio

muro dritto superiore

parete di avvolgimento inferiore bassa incudine

tipo di apparecchio Ustigichesky superiore anomocitico

inferiore anomocitico, stomi più che sul lato superiore della foglia

forma ovale dello stoma con cellule staminali di lenticchie

Caratteristiche dei peli densamente pubescenti con peli a forma di T costituiti da gambe a due, quattro cellule e peli flagellati pluricellulari, ci sono due tipi di peli: stellati e a forma di T con una gamba multicellulare

le strutture contenenti terpenoidi sono ghiandole di olio essenziale multicellulari di grandi dimensioni. ricettacoli schizogenici e cellule parenchimali non specializzate

al punto del tronco di un anno, scanalato, quasi nudo, cellule epidermiche allungate. Nel fusto del bambino di un anno, così come nel gambo di s. Sivers, un tipo di struttura puchkovy, ci sono ghiandole dell'olio essenziale, raramente peli e cellule stomatiche ovali; In entrambi i tipi di assenzio, le cellule epidermiche sulla corolla di fiori tubolari sono a parete sottile, allungate con estremità appuntite, caratterizzate dalla presenza di un gran numero di ghiandole dell'olio essenziale e dall'assenza di peli.

Gli indicatori di merchandising sono stati stabiliti su diversi lotti di materie prime:

Assenzio. Umidità (non più del 7%), ceneri totali (non superiori all'11%), ceneri insolubili in acido cloridrico al 10% (non più del 2%), sostanze estrattive (non meno del 33%), foglie brunastre e annerite (non più del 5%) ), impurità organica (non più del 2%), impurità minerale (non più dello 0,5%).

Assenzio annuale di erba. Umidità non superiore al 7%, ceneri totali (non superiori al 9%), ceneri insolubili in acido cloridrico al 10% (non più dell'1%), sostanze estrattive (non inferiori al 42%), foglie brunastre e annerite (non più del 5%), impurità organica (non più del 2%), impurità minerale (non più dello 0,5%).

Secondo i risultati di un'analisi fitochimica preliminare, nell'erba di Sivers e P. sono stati trovati olio essenziale, flavonoidi, tannini, acidi idrossicinnamici, cumarine, acidi grassi e lattoni sesquiterpenici.

Stock di Sivers e P. di un anno. La Tabella 2 fornisce dati sui rendimenti, sulle riserve biologiche (BZ) e operative (EZ) di Sivers e su quelli annuali, che crescono in diverse aree della Buriazia.

Stock di materie prime di s. Siver e di un anno nelle aree della Buriazia

area di raccolta (g / m2) E crescita eccessiva, (ha) BS (kg) EZ (kg)

ENV. Città di Gusinoozersk 58.0 ± 4.1 0.8 530.0 398.4

ENV. a. Ganzurino 33,8 ± 2,4,4 154,4 116,0

ENV. a. Borati 220.6 ± 15.1 20.0 50160.0 41100.0

ENV. con Taphar 500.0 ± 26.3 0.5 2763.0 2237.0

ENV. a. Sotnikovo 240.2 ± 19.4 25.0 69750.0 52850.0

ENV. Ulan-Ude 500.0 ± 32.5 0.5 2815.0 2175.0

Distretto Kabansky 285.SH = 19,7 30,0 97320,0 73680,0

Distretto di Tunkinsky 70.0 ± 8.0 0.2 172.0 108.0

Distretto di Pribaikalsky 280,9 ± 25,3 1,0 3315,0 2297,0

Distretto di Kurumkansky 370.6 ± 34.0 0.1 438.6 302.6

ENV. a. Hurumsha 228,0 ± 10,8 0,6 1497,6 1238,4

ENV. Popolazione 500,0 ± 46,2 30,0 177720,0 122280,0

ENV. a. Sotnikovo 39.0 ± 2.1 25.00 10800.0 8700.0

Distretto Kabansky 400.0 ± 27.1 30.0 136260.0 103740.0

La produttività della parte fuori terra dell'assenzio Siver e quella annuale nei boschetti studiati varia da 33,8 ± 2,4 a 500,0 ± 32,5 g / m2 e da 39 ± 2,1 a 500 ± 46,2 g / m2, rispettivamente. Le riserve biologiche e operative delle parti in superficie delle piante studiate sono 154,4-97320,0 kg e 116,0-73680,0 kg (Siver wormwood), 1,497,6177720,0 kg e 1238,4-122280,0 kg (assenzio annuale).

Studio chimico dell'erba di P. Sivers e P. dei flavonoidi annuali. Il contenuto quantitativo totale di flavonoidi è stato determinato dal metodo generalmente accettato di determinazione spettrofotometrica nell'erba delle annuali Sivers e P., in termini di luteolina-7-glucoside in diverse fasi dello sviluppo della pianta (vegetazione, germogliamento, fioritura, fruttificazione). Il più alto contenuto di flavonoidi è stato stabilito in campioni di Severs e campioni di un anno raccolti in fase di germogliamento - 0,68 e 0,66%, il più basso - nelle materie prime raccolte nella fase di fruttificazione - 0,31% e 0,38% (Tabella 3).

Il contenuto quantitativo della quantità di flavonoidi in termini di luteolina-7-glucoside nell'erba di P. Sivers e nell'erba di P. un anno a seconda della fase di vegetazione

fase di sviluppo delle piante, la quantità di flavonoidi, in termini di luteolina-7-glucoside (%)

Assenzio annuale degli assenzio

vegetazione 0,67 ± 0,02 0,64 ± 0,04

germogliare 0,68 ± 0,05 0,66 ± 0,03

fioritura 0,48 ± 0,03 0,52 ± 0,02

fruttificazione 0,31 ± 0,01 0,35 ± 0,01

I seguenti flavonoidi sono stati rilevati con il metodo HPLC-MS: rutina, luteolina-7-glucoside, chryo-eriol, quercetina nell'erba di Siver e nell'erba di un anno (Fig. 1).

Fig.1. Cromatogramma di flavonoidi e P. Sivers, P. un anno.

Il metodo standard esterno è stato utilizzato per determinare il contenuto quantitativo di rutina, criseriolo, quercetina nell'erba di Sivers e nell'erba del bambino di un anno (Tabella 4).

In entrambi i tipi di lombrichi, la luteolina-7-glucoside 0,04-0,08% (Sivers) e 0,88-1,77% (n ° un anno) è contenuta nella quantità maggiore, quercetina 0,001% (Sivers) e 0,0070,009% (n. annua).

Il contenuto quantitativo di flavonoidi (HPLC-MS)

Collezione Sivers Wormwood Flavonoid (%)

quercetina di luteolina-7-glucoside della rutina

Distretto Ivolginsky, ok. a. Taphar, 0,002 ± 0,0001 0,001 ± 0,0002 0,040 ± 0,003

Distretto Ivolginsky, ok. P. Sotnikovo 0,002 ± 0,0002 0,001 ± 0,0001 0,080 ± 0,005

Il FLY ha un anno e il Distretto Ivolginsky, ok. P. Sotnikovo 0,018 ± 0,001 0,007 ± 0,0003 0,880 ± 0,004

Distretto di Kabansky, ok. a. Scarafaggio 0,012 ± 0,002 0,009 ± 0,0003 1,700 ± 0,005

Acidi grassi I campioni di assenzio contengono da 8 a 13 acidi grassi. Comune per entrambe le specie sono gli acidi palmitico (16: 0), linoleico (18: 2p6), linolenico (18: ZpZ), nella quantità di 56,87-82,67% (degli acidi grassi totali) in Severs, 58,36-67,19% in n. un anno (di acidi grassi totali). Oltre a questi acidi, una quantità significativa contiene acido 10-ottadekenico (18: 1p8) dal 3,64% all'11,65%. Inoltre, in tutti i campioni sono stati rilevati 10-metil-undecanoico (¡12: 0) e 12-metil-tetradecanoico (e 15: 0), il loro contenuto non supera l'1%. I cromatogrammi sono mostrati in Figura 2.

Fig. 2. Cromatogrammi di acidi grassi (a) p. Sivers e (b) p. Un anno (I - (16: 0), 2 - (18: 2п6), 3 - (18: ЗПЗ), 4 - (18: 1п8) ).

Composizione elementale Nell'erba di p. Sivers, che cresce in varie regioni della Buriazia, il contenuto di calcio è 0,56 ± 0,02-0,89 ± 0,03%, magnesio - 0,12 ± 0,01-0,28 ± 0,01%. Il più alto contenuto di calcio e magnesio è presente nei campioni raccolti nel distretto di Kurumkansky, il più basso contenuto di magnesio nelle materie prime del distretto di Tunkinsky e il calcio nelle piante raccolte nel distretto di Selenginsky. Il ferro si trova principalmente nelle piante della regione di Kurumkansky

(141,25 ± 12,13 mg / kg), meno - dal distretto di Selenginsky (141,25 ± 12,13 mg / kg).

Il contenuto di zinco varia da 23,73 ± 1,56 a 59,8 ± 1,56 mg / kg - п. I vermi e da 55.32 ± 0.83 a 66.50 + 0.89 mg / kg hanno un anno di età, il che è accettabile per il normale funzionamento dei processi biochimici. Il contenuto di rame è 8,42 ± 0,45-24,30 ± 1,56 mg / kg -n. Sivers, 9,37 + 0,18-13,48 + 0,44 mg / kg - un anno (la quantità richiesta è compresa tra 5 e 30 mg / kg). Il nichel nell'erba di Seabera contiene 0,40 ± 0,01 -2,06 ± 0,03 mg / kg, che corrisponde a un fabbisogno di piante compreso tra 0,1 e 5 mg / kg. Il contenuto di cobalto nella pianta non deve superare 1 mg / kg, piombo - 10 mg / kg, cadmio - 0,2 mg / kg, cromo - 1,0 mg / kg (Kabata-Pendias, 1989; Kashin, 2009). In Sivers P. Il contenuto di cobalto è inferiore a 0,3 mg / kg, il piombo è 3,19 ± 0,11 mg / kg, in un anno - 0,59 ± 0,02 mg / kg, cadmio - 0,18 ± 0,02 mg / kg, cromo - 0,76 ± 0,02 mg / kg in tutti i campioni. Pertanto, il contenuto di macro e micronutrienti è in concentrazioni normali e sufficienti per il flusso di funzioni vitali per le piante.

Siver l'olio essenziale di erbe di assenzio. L'olio essenziale delle piante è stato isolato con il metodo farmacopea n. 2. In vari campioni di p. Sivers il contenuto di olio essenziale varia dallo 0,1 all'1,9%. Negli oli essenziali di Siver, che crescono in diverse parti della Buriazia, sono stati identificati oltre 80 composti.

Abbiamo studiato la composizione di olii essenziali isolati dall'erba di assenzio Siver, che cresce in diverse parti della Buriazia

(Ivolginsky (1), Selenginsky (2), Kurumkansky (3), Pribaikalsky (4.9),

Tunkinsky (5), distretti di Zakamensky (8)), regione di Irkutsk (isola di Olkhon) (6) e Mongolia (7). La maggiore produzione di olio essenziale è nell'assenzio Siver che cresce nelle regioni di Tunkinsky e Kurumkansky (0,4%). La quantità minima di olio è stata isolata dalle piante raccolte sul territorio di Zakamensky, nelle regioni di Pribaikalsky e in Mongolia (0,1%) (Figura 3).

La dinamica dell'accumulo di olio essenziale è stata studiata in base alla fase di sviluppo della pianta (Figura 4). I risultati hanno mostrato che nella maggior quantità di olio si accumula nella fase di fioritura (0,6%), a

Fig. 3. La resa di olio essenziale p. Siver dal luogo di crescita.

fasi di germogliamento e fruttificazione accumulano la stessa quantità di olio essenziale (circa 0,3%).

1- 1,8-daneolo I-terpineal-4 3-p-pharmacne '1 ■ sishna-4,11-dnen

Fig. 5. Cromatogramma di olio essenziale p. Sivers.

Fig. 4. La resa di olio essenziale p.

Siver nelle diverse fasi di sviluppo della pianta (stagione di crescita, b - germogliamento, c - fioritura,

Tutti i componenti dell'olio essenziale possono essere suddivisi in due gruppi: costante, cioè presente nell'olio in tutte le fasi dello sviluppo della pianta e sporadicamente presente (minore). In tutti i campioni di olio essenziale di Siver, indipendentemente dall'area di coltivazione, 1,8-cineolo (2,34-22,57%), terpineolo-4 (0,964,70%), germacrene E (8,66-12,36%), P-farnezen (0,64-5,17%), Selina-4,11-diene (0,97-4,66%), Neril-2-metilbutanoato (4,80-8,79%) e Chamazulene (0,60-25,36%) (Fig. 5).

Gli oli essenziali, isolati dalle piante che crescono nelle regioni steppiche, nel distretto di Pribaikalsky (25,36%), contengono la più piccola quantità di hamazulene, e la più piccola - nel distretto di Zakamensky (0,60%).

Nella composizione dell'olio essenziale isolato dalle piante in diverse fasi di sviluppo - vegetazione, germogliamento, fioritura e fruttificazione, sono stati identificati 54 composti. I componenti costanti sono 1,8-cyneol, linalolo, terpineolo-4, a-terpineolo, p-farnezen, selina-4,11-diene, camazulene.

Il contenuto di chamazulene varia da 0,20 a 24,69% nella fase di vegetazione, dal 21,34 al 61,91% nella fase di germogliamento, dall'1,53 al 34,42% nella fase di fioritura, dal 10,87 al 20,64% nella fase di fruttificazione. L'insieme di componenti che appaiono sporadicamente è significativo (fino a 40 composti) allo stesso tempo basso nel loro contenuto quantitativo, pertanto è difficile identificare la dipendenza della loro composizione nella fase di sviluppo della pianta.

Per valutare l'influenza della fase di sviluppo sui componenti dell'olio è stato utilizzato CIM (Fig. 6).

Fig. 6. Modello GK a seconda della composizione

olio essenziale dalla fase di sviluppo di Sivers (vegetazione I, 2 germogliamento, 3-fioritura, 4-fruttificazione)

questa è una delle analisi

dati multidimensionali, che consentono di allocare variabili nascoste in grandi matrici di dati e analizzare relazioni,

esistente nel sistema studiato. L'obiettivo del metodo del componente principale è quello di sostituire la descrizione originale dei campioni utilizzando le variabili p per un nuovo modulo, rappresentato nello spazio dei componenti principali (Esbenson, 2010).

Sul modello GK, è possibile distinguere aree separate delimitate l'una dall'altra e corrispondenti a diverse fasi di sviluppo dell'assenzio Siver, che indica che la composizione del burro nelle diverse fasi di sviluppo differisce nel contenuto di composti minori.

Pertanto, in diverse fasi dello sviluppo di Sivers, la composizione qualitativa dell'olio essenziale coincide in costante e differisce in composti minori.

Uno studio sulle fasi di sviluppo della pianta ha mostrato che la maggior quantità di chamazulene nell'olio essenziale di Seversa è concentrata nelle fasi di germogliamento e fioritura, mentre l'accumulo di olio nella fase di fioritura è maggiore rispetto alla fase di germogliamento. Pertanto, durante queste fasi, abbiamo studiato le peculiarità dell'accumulo di oli essenziali in varie parti della pianta (Fig. 7).

Sulla fase del germogliamento Nella fase di fioritura

Fig. 7. La resa di olio essenziale in varie parti di Sivers.

l'olio essenziale estraibile proveniente da diverse parti delle piante durante la fase di fioritura ha mostrato che le infiorescenze (cestini) sono caratterizzate dalla massima resa, le foglie sono più piccole e gli steli sono minimi. In fase

germogliare nell'erba di P. Sivers contiene soprattutto olio nelle gemme, un po 'meno nelle foglie e la quantità minima di olio negli steli.

Un'analisi dell'olio essenziale proveniente da diverse parti della pianta ha rivelato che la composizione componente dell'olio estratto dalle infiorescenze e dai germogli di erba di Sivers è molto diversa da oltre 70 componenti, quindi più di 40 componenti dalle foglie e meno di tutti i composti nell'olio estratto dagli steli sono circa 20 componenti. I componenti costanti dei campioni di olio essenziale, indipendentemente dalla loro posizione, sono 1,8-cyneol, linalolo, terpineolo-4, germacren 13, a-terpineolo, a-bisabololo e camazulene (Tabella 5).

Componenti costanti di Siver Wormwood Essential Oil

contenuto di componenti di componenti in% di olio intero

fase di germogliamento della fase di fioritura

infiorescenze foglie steli germogli foglie gambi

1,8-cineole 8,00 6,39 6,04 1,94 + 23,41

linalool 5,93 1,38 0,65 + + 3,83

terpineol-4 2,56 2,10 0,57 0,88 + 5,37

a-terpineol 2,39 2,10 0,82 1,44 + 4,66

Germakren E 7,20 7,81 1,96 11,18 7,81 10,57

a-bisabololo 2,28 1,25 1,66 5,24 10,93 5,86

Chamazulene 6.23 23.02 37.11 7.81 21.17 3.51

L'analisi ha mostrato che in diverse aree di crescita, in diverse fasi di sviluppo e in diverse parti del Seversa, la composizione qualitativa dell'olio essenziale coincide in costante e si differenzia in composti che appaiono sporadicamente.

Olio essenziale di erbe annuali di assenzio. Come nel primo caso, la selezione dell'olio essenziale è stata effettuata con il metodo farmacopea n. 2. La composizione chimica di P. oli essenziali annuali è rappresentata da 40 componenti. I componenti costanti sono artemisia chetone (10.24-14.62%), caryophyllen (9,93-10,71%), germacrene B (3,53- 7,82%), p-selenene (21,75-29,46%), cariofillenossido (4,44-14,31%) (Fig. 8).

In diverse fasi dello sviluppo della pianta, dallo 0,5% allo 0,7% dell'olio essenziale viene estratto dall'erba degli assenzio. La più alta resa di olio essenziale nella fase di fioritura (0,7%) (Fig.9).

In tutte le fasi dello sviluppo della pianta, l'olio essenziale contiene artemisia chetone, cariofillina (3-selenio, cariofilene ossido) e il contenuto quantitativo delle componenti principali cambia in diverse fasi dello sviluppo della pianta. e ossido di cariofillen - nella fase di fioritura.

3. Cromatogramma di olio essenziale a un anno.

Fig. 9. La resa di olio essenziale p annuale in diverse fasi di sviluppo della pianta (in-vegetazione, b-bud, c-fioritura, p-fruttificazione).

Le ghiandole dell'olio essenziale sono distribuite in modo non uniforme nella pianta, pertanto, da diverse parti della pianta, si possono distinguere gli olii essenziali, che differiscono sia quantitativamente che qualitativamente.

Sono state determinate le peculiarità dell'accumulo di olii essenziali nella fase di fioritura in varie parti del wormwood annuale (figura 10).

Più di 60 composti sono stati trovati in oli essenziali provenienti da diverse parti della pianta. costante

componenti per oli da infiorescenze, foglie, gambi sono alcol di artemisia, p-cariofillina, ossido

Il principale componente dell'olio essenziale annuale è l'artemisia chetone, che non si trova nell'olio degli steli, sebbene sia per metà nell'olio delle infiorescenze (49,14%) e quasi un terzo delle foglie (29,76%).

L'analisi degli oli essenziali ha dimostrato che in diverse aree di crescita, in diverse fasi di sviluppo e in diverse parti dell'erba annua, così come l'erba di Sievers, la composizione qualitativa dell'olio essenziale è la stessa in costanti e differenti componenti sporadicamente apparenti.

Sviluppo di un metodo per la determinazione quantitativa dell'artemisinina nell'assenzio con un metodo annuale HPLC-MS

Selezione delle condizioni per l'estrazione quantitativa di artemisinina dall'assenzio annuale. Sviluppare una metodologia quantitativa

1 2 di Fig. 10. La resa di olio essenziale in diverse parti della annuale (1-infiorescenza, 2 foglie, 3 steli).

Le determinazioni di artemisinina nell'erba di P. di condizioni di estrazione di un anno sono state selezionate in base alle quali l'estrazione di artemisinina raggiunge il suo valore massimo. Sono stati analizzati gli estratti ottenuti con i metodi di macerazione, estrazione di ultrasuoni e estrazione subcritica di CO2. Vari solventi sono stati usati come estrattivi (Tabella 6). Il contenuto di artemisinina in estratti separati mediante estrazione con ultrasuoni e macerazione con diversi solventi non è significativamente differente (0,038-0,040%). La maggior quantità di artemisinina (0,054%) è contenuta nell'estratto ottenuto durante l'estrazione subcritica di CO2.

Metodi e parametri per estrarre estratti dall'erba di assenzio di un anno con vari metodi di estrazione ______

metodo di estrazione estrazione tempo di estrazione / parametri di artemisinin contenuto in%, in termini di a.s.s.

etanolo 24 ore / rapporto delle materie prime: solvente (1: 5), T = 25 ° С 0,040 ± 0,002

Macerazione di etanolo 48 h / rapporto delle materie prime: solvente (1: 5), T = 25 ° С 0,038 ± 0,002

Esano 24 h / Campione: rapporto solvente (1: 5), T = 25 ° С 0,039 ± 0,002

acetato di etile 15 min / rapporto materie prime: solvente (1: 5), frequenza del suono 50 kHz, T = 25 ° С 0,022 ± 0,001

etanolo 5 min / rapporto delle materie prime: solvente (1: 5), frequenza del suono 50 KHz, T = 25 ° С 0,022 ± 0,001

Estrazione ultrasonica di etanolo 10 min / Rapporto tra materie prime: solvente (1: 5), frequenza del suono 50 KHz, T = 25 ° С 0.024 ± 0.001

etanolo 15 min / rapporto delle materie prime: solvente (1: 5), frequenza del suono 50 KHz, T = 25C, C 0,039 ± 0,002

etanolo 20 min / rapporto delle materie prime: solvente (1: 5), frequenza del suono 50 kHz, T = 25 ° С 0,039 ± 0,002

CO2-estrazione di CO2 24 h.1 portata 30 l / h, T = 20-22 ° C, P = 6,0-6,2 MPa 0,054 ± 0,003

Tra tutti i metodi di estrazione proposti, l'estrazione ultrasonica è ottimale (estrattore di etanolo), poiché questo metodo è rapido (tempo di estrazione 15 minuti) e disponibile per strumentazione.

Metodo di determinazione quantitativa dell'artemisinina.

Lo sviluppo di una tecnica per la determinazione quantitativa dell'artemisinina nell'erba di quella annuale è stata effettuata mediante HPLC-MS. Abbiamo usato Agilent 1200 HPLC con un rilevatore MC ("trappola ionica") 6330, un metodo di ionizzazione - elettrospray. L'eluizione è stata effettuata in modalità isocratica (50% (A): 50% (B)), la composizione del tampone di partenza (A) - soluzione acquosa di acido formico (pH = 3) + 2 ml di una soluzione satura di acetato di ammonio, tampone di eluizione (B) - 100% acetonitrile. La portata volumetrica dell'eluente è di 0,5 ml / min, il volume del campione iniettato è di -25 μl. Gli ioni sono stati registrati nella modalità di monitoraggio di ioni caricati positivamente (SRM) con una massa di 300 (dovuta all'aggiunta di ione NrH4 alla molecola di artemisinina), larghezza della finestra (299301) m / z. I risultati sono stati confermati dalla spettrometria di massa tandem: uno ione figlia (MS2) con una massa di 223 m / z è stato ottenuto dallo ione genitore (MS) con una massa di 300 m / z.

La coincidenza dei tempi di ritenzione e degli spettri di massa di artemisinina, determinati nell'erba di un anno con l'uso della soluzione di CO del composto indicato, ci consente di concludere che il composto puro è identico all'artemisinina pura (Fig.11, 12).

Fig. 11. Cromatogramma di CO artemisinina e P. estratto annuale.

iv ix язтжяауат ассс »

Figura 12. Spettri di massa di a) artemisinina contenuta nell'erba annuale, b) di artemisinina CO.

Per la cromatografia-spettrometria di massa, è stato utilizzato un metodo di calibrazione assoluto per l'analisi quantitativa. Per determinare il coefficiente della curva di calibrazione, sono state preparate diverse (almeno 20) soluzioni di calibrazione di artemisinina. La preparazione delle soluzioni è stata effettuata come segue: sono stati pesati 5 * 10 "3 g di artemisinina, posti in un matraccio tarato da 50 ml, sono stati aggiunti 25 mi di acetonitrile.

accuratamente miscelato fino alla dissoluzione completa, dopo di che il volume nel pallone è stato portato a segno con acqua distillata. Analisi condotta a diverso volume del campione iniettato da 1 a 40 μl. È stata misurata l'area di picco nei cromatogrammi. Secondo i dati ottenuti, è stata costruita una curva di calibrazione (figura 13). I valori dell'area del picco sono stati tracciati sull'asse delle ordinate e i valori corrispondenti del contenuto di artemisina (g) sono stati tracciati sull'asse delle ascisse.

Dai dati ottenuti, è stato calcolato il coefficiente della curva di calibrazione: к = Б / х, dove к è il coefficiente della curva di calibrazione, 5 è l'area di picco della soluzione analizzata, х è il contenuto di artemisinina (g)

Il coefficiente della curva di calibrazione (k) è definito come la media aritmetica dei coefficienti k,.

Fig. 13. Grafico di laurea per determinare il contenuto di artemisinina.

Il contenuto di artemisinina nell'estratto di un assenzio di un anno è stato determinato dalla formula: C = 5 / c, dove 5 è l'area di picco di artemisinina nella soluzione analizzata, e k è il coefficiente della curva di calibrazione. I dati metrologici sulla determinazione del coefficiente della curva di calibrazione (k) sono riportati in Tabella 7.

Caratteristiche metrologiche del calcolo del coefficiente della curva di calibrazione artemisinina

1 X Э2 Э Р ЮУ) Дх Е,%

19 1.32 * 10 m 1.84 * О15 4.25 * 10 "95 2.09 1.28 * 10" 1.97 1.90 * 10 "

I risultati della determinazione quantitativa dell'artemisinina nell'estratto annuale di assenzio sono presentati nella tabella 8.

I risultati della determinazione quantitativa di artemisinina nell'estratto di wormwood metodo di un anno HPLC-MS

Caratteristiche metrologiche (n = 5, P = 95%)

0,039 0,75 * 10 "'0,27 * 10" 2 2,57 0,83 * 10 ° 1,21 0,12 * 10 "'

Il metodo sviluppato ha determinato il contenuto quantitativo di artemisinina nell'erba n. Di un anno nella fase di fioritura (Tabella 9). La tecnica è convalidata: specificità, precisione confermata.

Il contenuto di artemisinina nell'assenzio annuale di erba

Area di Artemisinina e data di raccolta (%)

Distretto di Ivolginsky, 10 km da Sotnikovo, 08/12/2010 0,054 ± 0,003

Ivolginhiy rn, 10 km da Sotnikovo, 22/08/2011 0,027 ^ 0,001

Distretto Ivolginsky, ok. a. Oriole, 19/08/2011 0,069 ± 0,004

Distretto di Kabansky, ok. a. Tarakanovka, 08.22.2011 0.023 ± 0.001

In campioni raccolti nella regione Ivolginsky, nelle vicinanze di L'Oriole contiene la più alta quantità di artemisinina (0,069%), il più piccolo - in campioni del distretto di Kabansky, okr. a. Scarafaggio (0,023%). È stato stabilito che la maggior quantità di piante di artemisinina si concentra nella fase di fioritura - 0,039%, la più piccola - nella vegetazione e nelle fasi di germogliamento - dallo 0,006 allo 0,007%. Le infiorescenze di artemisinina contengono - 0,029%, leggermente meno - 0,021% nelle foglie e la quantità minima nei gambi è 0,007% (Tabella 10).

Il contenuto di artemisinina nell'erba annuale dell'ossigeno, a seconda della fase di vegetazione, in diverse parti della pianta

fase di sviluppo della pianta

vegetazione germogliamento fioritura foglie steli infiorescenza

0,006 ± 0,0002 0,007 ± 0,0002 0,039 ± 0,003 0,021 ± 0,001 0,029 ± 0,002 0,007 ± 0,0002

Pertanto, il momento ottimale per la raccolta dell'erba degli assenzio annuali è la fase di fioritura, ed è consigliabile raccogliere l'intera parte aerea.

Tutti i risultati ottenuti sono inclusi nei progetti FS sull'erba degli assenzio Siver e sull'erba degli assenzio annuali.

1. Sono state rivelate le principali caratteristiche diagnostiche dell'erba di Sivers e P. di un anno di erba, sono stati sviluppati gli indicatori numerici necessari per la standardizzazione delle materie prime. Le riserve di Sivers e P., che crescono in diverse aree della Repubblica di Buriazia, sono identificate.

2. Il contenuto di flavonoidi, acidi grassi, macro e micronutrienti nell'erba di Sivers n e nell'erba di n. Un anno è stato stabilito. Flavonoidi - luteolina-7-glucoside, rutina, quercetina e chryoeriolo sono stati rilevati con il metodo HPLC-MS in queste piante. I principali acidi grassi nei tipi studiati di assenzio sono palmitici, linoleici, linolenici, il 10% di acido ottadekenico si trova anche in assenzio significativo.

3. È stato stabilito che la composizione qualitativa degli oli essenziali vegetali rimane costante indipendentemente dal luogo di crescita e dalla fase di sviluppo. I componenti costanti di Sivers sono 1,8-cyneol, terpineol-4, D germacren, p-farnesen, Selina-4,11-diene, neil-2-metilbutanoato e chamazulene e Artemisia chetone, cariofillina, germacrene di un anno D, p-seleniene, ossido cariofilo. L'accumulo di olio essenziale nella fase di fioritura è maggiore (0,7%) rispetto alla fase in erba (0,3%). La maggior quantità di chamazulene p. Siver si accumula nelle fasi di germogliamento (fino al 62%) e fioritura (fino al 34%).

4. Sono state determinate le condizioni per l'estrazione di artemisinina (tipo di estraente, metodo di estrazione, tempo di estrazione) dall'erba annuale e si è stabilito che l'estrazione massima di artemisinina è ottenuta con l'estrazione di CO2 ultrasonica e preciclica. Un metodo per la determinazione quantitativa dell'artemisinina è stato sviluppato e convalidato in un metodo HPLC-MS a un anno (errore relativo di determinazione di ± 1,21%). È stato stabilito che la maggior quantità di artemisinina nell'erba di un'erba annuale si accumula durante la fase di fioritura in infiorescenze (0,039%).

5. Documenti normativi sviluppati per le materie prime - il progetto di FS "L'erba di Sivers wormwood" e il progetto di FS di "Grass of wormwood one year".

Elenco degli articoli pubblicati sul tema della tesi

1. Zhigzhitzhapova, C.B. La composizione chimica dell'olio essenziale Artemisia gmelinii Web. et Stechm, originario dell'Asia centrale / C.B. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva e Plant Chemistry.-2010.-№2.-С. 131-133.

2. Zhigzhitzhapova, C.B. Composizione chimica di Siver olio essenziale di assenzio Artemisia sieversiana Willd., Coltivato in Buriazia / S.V. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva, V.V. Taraskin // Bollettino dell'Università statale di Buryat. Ser. Chimica-Physics. - 2009. -Con. 3. - pagina 69-71.

3. Zhigzhitzhapova, C.B. Composizione di Siver olio essenziale di assenzio Artemisia sieversiana Willd., Coltivato in Buriazia e nella regione di Irkutsk / S.V. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva, V.V. Taraskin // Bollettino del centro scientifico della Siberia orientale del ramo siberiano dell'Accademia russa delle scienze mediche. - 2009. - №2 (66). -C. 103-105.

4. Zhigzhitzhapova, S.V. La composizione dell'olio essenziale di Artemisia sieversiana Willd. a diverse fasi di sviluppo della pianta / S.V. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva // Bollettino del centro scientifico della Siberia orientale del ramo siberiano dell'Accademia russa di scienze mediche. - 2011. - №1 (77). Parte 2. - Pag. 138-141.

5. Soktoeva, TE La composizione componente dell'olio essenziale Artemisia glauca Pall, ex Willd. flora della Mongolia / T.E. Soktoeva, S.V. Zhigzhitzhapova, LD

Radnaeva, B.B. Taraskin // Bollettino di giovani scienziati. - Tomsk, 2011. -Vyp. 2. - Pag. 27-30.

6. Soktoeva, TE La composizione chimica dell'olio essenziale Artemisia gmelinii Web. Et Stechm. / T.E. Soktoev // Lomonosov-2009: materiali del XVI Intern. Conf. studenti, dottorandi e giovani scienziati. - Mosca, 2009. - p. 37.

7. Zhigzhitzhapova, C.B. Olio essenziale di assenzio Gmelin flora Buriazia e Mongolia / C.B. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva // "Nuovi traguardi nella chimica e nella tecnologia chimica delle materie prime vegetali": materiali della IV All-Russia. scientifica. Conf. - Barnaul, 2009. - Pag. 49-50.

8. Soktoeva, T.E. La composizione dell'olio essenziale di Siver assenzio Artemisia sieversiana Willd., Che cresce nella Repubblica di Buriazia / T.E. Soktoeva, C.B. Zhigzhitzhapova, LD Radnaeva // "Tecnologie e attrezzature delle industrie chimiche, biotecnologiche e alimentari": materiali del II Vseross. Scien. Conf. studenti, dottorandi e giovani scienziati. - Biysk, 2009. - P. 91-93.

9. Pavlova E.T. Separazione cromatografica e determinazione quantitativa dei componenti dei farmaci mediante HPLC / TE Soktoeva, T.A. Kolodin // "Problemi di sviluppo sostenibile della regione": materiali del quinto seminario scolastico di giovani scienziati russi. - Ulan-Ude, 2009. - Pag. 222-223.

10. Zhigzhitzhapova, S.V. Analisi comparativa delle composizioni chimiche di Artemisia L., in crescita in Asia centrale / S.V. Zhigzhitzhapova, T.E. Soktoeva, L.D. Radnaeva, O. Grahl-Nilsen // "Modem Methods of Data Analysis" Settimo simposio invernale sulla chemiometria. - San Pietroburgo, 2010. - P. 82-83.

11. Soktoeva, T.E. Analisi comparativa della composizione degli oli essenziali della polynia del genere Artemisia L., coltivata in Asia centrale / TE Soktoeva // "Tecnologie e materiali rispettosi dell'ambiente e delle risorse": materiali della regione, gioventù scientifica. Conf. dall'Intern. partecipazione. - Ulan-Ude, 2010.-S. 109-110.

12. Zhigzhitzhapova, C.B. Oli essenziali di Artemisia L. / C.B. polynia genere. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva // "Lo sviluppo della medicina tradizionale in Russia: esperienza, ricerca, prospettive": materiali nauchn. Conf. dall'Intern. partecipazione. - Ulan-Ude, 2010. - Pag. 405-407.

13. Soktoeva, T.E. La composizione dell'olio essenziale dei fratelli assenzio Artemisia sieversiana Willd. / T.E. Soktoyeva, C.B. Zhigzhitzhapova, LD Radnaeva // "Studi attuali del Baikal Asia": materiali dell'Intern. Scien. Conf, - Ulan-Ude, 2010. - Pag. 309-312.

14. Badmaeva, E.E. La composizione dell'olio essenziale di Artemisia macrocephala Jacq. ex Bess. in crescita in Mongolia / E.E. Badmaeva,

TE Soktoeva // "Ecologia della Russia e territori adiacenti": materiali della XV Internazionale. con l'ambiente - Novosibirsk, 2010. - p. 325.

15. Badmaeva, E.E. La composizione dell'olio essenziale di Artemisia annua / EE. Badmaeva, T.E. Soktoeva, C.B. Zhigzhitzhapova, LD Radnaeva // "Tecnologie ecocompatibili e di risparmio delle risorse": materiali Vseross. conferenza dei giovani. dall'Intern. partecipazione. - Ulan-Ude, 2011. -C. 156-157.

16. Soktoeva, T.E. Estrazione di artemisinina da assenzio annuale Artemisia annua L. / T.E. Soktoeva, G.L. Ryzhov, K.A. Dychko, V.V. Khasanov, C.B. Zhigzhitzhapova, LD Radnaeva // "Priorità e caratteristiche dello sviluppo della regione del Baikal": materiali del Vth internazionale. Scien. Conf. - Ulan-Ude, 2011. - Pag. 127-128.

17. Zhigzhitzhapova, C.B. La composizione chimica di Artemisia annua L. / C.B. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva // "Vegetazione della regione del Baikal e territori adiacenti": materiali di Vseross. Scien. Conf. - Ulan-Ude, 2011. - Pag. 152-153.

Spettrofotometria di assorbimento atomico AAS

psl materie prime assolutamente asciutte

Sostanze biologicamente attive

Riserve biologiche GZ

Cromatografia su carta BH

OMS Organizzazione mondiale della sanità

Cromatografia di massa liquida ad alte prestazioni HPLC-MS

GF State Pharmacopoeia

Metodo ISC dei componenti principali

Campione standard di CO

quella cromatografia su strato sottile

Riserve operative EZ

SRM Select Reaction Monitoring

L'autore esprime sincera gratitudine al supervisore degli studi, D.Sc., prof. LD Radnaeva, nonché Ph.D., professore associato, ricercatore senior Baikal Institute of Nature Management del ramo siberiano dell'Accademia delle scienze russa Zhigzhitzhapova C.B., dottore in chimica, professore onorario Tomsk State University Ryzhova G.L. per aiuto e supporto nella preparazione della tesi.

È stato firmato il 21/11/2011. Formato 60x84 1/16. Carta offset Volume 1,5pech. l. Circolazione 100. Numero ordine 67.

Stampato nella tipografia della casa editrice BNTS SB RAS. 670047 Ulan-Ude, ul. Sakhyanova, 6.

Sommario della tesi di Soktoev, Tuyana Erdemovna :: 2011 :: Ulan-Ude

Capitolo 1. REVISIONE DELLA LETTERATURA

Lo stato attuale della ricerca sullo studio del genere Artemisia L.

1.1. Caratteristiche botaniche di Siver assenzio e dodicesimo assenzio annuale

1.2. Oli essenziali e piante azulene naturali del genere Wormwood

1.2.1. La composizione chimica di oli essenziali e azulene naturali 14 piante del genere Wormwood

1.2.2. L'uso di oli essenziali di piante del genere Wormwood in medicina

1.2. Artemisinina: scoperta, struttura e sintesi, proprietà fisico-chimiche 31, meccanismo di azione antiplasmodium

1.3. Composizione di acidi grassi delle piante del genere Wormwood

1.4. Composti fenolici di piante del genere Wormwood

1.5. La composizione elementale delle piante del genere Wormwood 38 CONCLUSIONI ALLA TESTA

CAPITOLO 2. CARATTERISTICHE DI OGGETTI E METODI 41 RICERCA

2.1. Oggetti di studio, campioni di materie prime - erba di assenzio Sivers e 41 erbe di assenzio annuale

2.2. Metodi di ricerca

2.2.1. Metodi di ricerca biologica

2.2.1.1. Studio anatomico e diagnostico

2.2.1.2. Ricerca di risorse

2.2.2. Metodi per la determinazione qualitativa e quantitativa di 43 sostanze biologicamente attive

2.2.3. Analisi di merchandising: metodi per stabilire 50 materie prime di buona qualità

2.2.4. Metodi di elaborazione statistica. Il metodo del componente principale.

CAPITOLO 3. ANALISI FARMACOGNOSTICA DELL'ERBALIS ERBALE 53 CIVERI

3.1. Analisi microscopica dell'erba di Assenzio

3.2. Azioni di Sibers Wormwood

3.3. Lo studio dei principali boschetti di erba vertebrale di BAS

3.3.1. Contenuto qualitativo e quantitativo dei componenti 64 olio essenziale di assenzio Siver

3.3.1.1. La composizione chimica e la dinamica dell'accumulo di olio essenziale e 64 hamazulena nell'erba del Siver assenzio in varie zone della Buriazia

3.3.1.2. Peculiarità di accumulo di olio essenziale e camazulene nell'erba di 65 Siver assenzio in diverse fasi di sviluppo vegetale

3.3.1.3. L'accumulo di componenti minori dell'olio essenziale dell'erba 71 Siver l'assenzio

3.3.1.4. Caratteristiche dell'accumulo di olio essenziale e camazulene nell'erba 72 Assenzio di Siver da diverse parti della pianta

3.3.2. Il contenuto qualitativo e quantitativo di flavonoidi e tannini nell'erba dell'assenzio Siver

3.3.3. Composizione di acidi grassi di erba di assenzio Siver

3.3.4. Composizione elementare del wormwood annuale annuale CONCLUSIONI DEL CAPITOLO

CAPITOLO 4. ANALISI FARMACOGNOSTICHE DI ERBE DI ERBE 83 UN ANNO

4.1. Analisi al microscopio dell'annuale assenzio annuale

4.2. Scorte di assenzio annuale

4.3. Lo studio del principale assenzio annuale dell'erba di BAS

4.3.1. Il contenuto qualitativo e quantitativo dei componenti dell'olio essenziale nell'assenzio annuale delle erbe

4.3.1.1. La composizione chimica e la dinamica dell'accumulo di olio essenziale in 92 erba di assenzio di un anno da diversi luoghi di crescita

4.3.1.2. Peculiarità di accumulo di olio essenziale nell'erba di assenzio annuale su diverse fasi di sviluppo e in diverse parti della pianta

4.3.2. Determinazione qualitativa e quantitativa dei flavonoidi erba 100 assenzio annuale

4.3.3. Composizione di acidi grassi del wormwood annuale ^ ® *

4.3.4. La composizione elementale del wormwood annuale

4.4. Sviluppo di un metodo per la determinazione quantitativa dell'artemisinina nell'erba 103 di un assenzio con un metodo annuale di HPLC-MS

4.4.1. Selezione delle condizioni per l'estrazione quantitativa di artemisinina da 103 assenzio di un anno

4.4.2. Sviluppo di una tecnica per la determinazione quantitativa dell'artemisinina 104 mediante HPLC-MS

4.4.3. Contenuto quantitativo di artemisinina nell'assenzio annuale da diversi punti di crescita

4.4.4. Analisi del contenuto quantitativo di artemisinina nell'erba 107 assenzio annuale su diverse fasi di sviluppo e in diverse 'parti della pianta

CAPITOLO 5. IMPOSTAZIONE DEGLI INDICATORI 111 BENESSERE DELLE MATERIE PRIME

5.1. Indicatori morfometrici delle materie prime

5.2. Standardizzazione dei fratelli dell'erba assenzio

5.2.1. Indicatori di merchandising erba Sills assenzio!

5.2.2. Standardizzazione dell'erba di assenzio di Sivers secondo il contenuto di 115 hamazulelen nella composizione di olio essenziale

5.2.3. Stabilire la durata di conservazione dell'erba di assenzio

5.3. Standardizzazione dell'assenzio annuale di erbe aromatiche ^ ^ ^

5.3.1. Indicatori delle materie prime erba sagebrush annuale * '^

5.3.2. Standardizzazione dell'assenzio annuale di erbe sul contenuto di artemisinina

5.3.3. Stabilire la durata di conservazione annuale dell'ossigeno delle erbe

Introduzione della tesi sul tema "Chimica farmaceutica, farmacognosia", Soktoeva, Tuyana Erdemovna, abstract

Pertinenza dell'argomento. Piante genere Artemisia (Artemisia) -perspektivnye fonti di sostanze biologicamente attive, specie come dragoncello Artemisia dracunculus L., artemisia Artemisia absinthium L., Artemisia vulgaris L. Artemisia vulgaris ampiamente utilizzati nei tradizionali olistica industrie, medicina e alimentare. L'Artemisia annua L., un assenzio annuale, è stata introdotta con successo in coltura in molti paesi e nel 2001 è stata raccomandata dall'OMS come la principale fonte di artemisinina, il trattamento di prima linea per la malaria. Oggi, i paesi produttori di artemisina forniscono circa un quarto del fabbisogno globale di salute [1, 2]. 137 composti biologicamente attivi sono stati isolati dal bambino di un anno, inclusi 40 sesquiterpeni, 10 triterpeni, 7 cumarine, 46 flavonoidi, che possono servire come base per lo sviluppo di farmaci [3]. Negli anni '80 del XX secolo, un gruppo di scienziati [4] tentò di coltivare la sezione a crescita spontanea della flora di un anno dell'URSS nell'ULI (Mosca). Al giorno d'oggi, importanti lavori per l'introduzione del primo anno sono effettuati presso la Tomsk State University. In Buriazia, l'annuale è una specie a crescita spontanea.

Insieme al bambino di un anno in Buriazia, Artemisia sieversiana Willd assomiglia all'assassinio di Siver. È molto diffuso, ed è anche una specie promettente. Nell'erba di P. Sievers contengono flavonoidi, olio essenziale, cumarine [5-8]. L'olio essenziale di Seabera è interessante come fonte di Chamazulene, un composto non tossico con effetti anti-infiammatori, battericidi e rigenerativi [9, 10].

Obiettivo: Studio farmacognostico sull'assenzio Siver Artemisia sieversiana Willd. e l'Artemisia annua L. annua come preziose fonti di sostanze biologicamente attive.

Per raggiungere questo obiettivo è necessario risolvere i seguenti compiti:

1. Identificare le caratteristiche anatomiche e diagnostiche della parte fuori terra di Sivers p. E p. Un anno, stabilire indicatori di materie prime delle materie prime, valutare le riserve e la possibilità di raccolta p. Di un anno e Sivers sul territorio della Repubblica di Buriazia;

3. Sviluppare un metodo per la determinazione quantitativa dell'artemisinina nella parte aerea del bambino di un anno;

Gli indicatori di qualità stabiliti di BAS inclusi nei documenti normativi.

Significato pratico. Le riserve e il possibile volume annuale di approvvigionamento di un insediamento di Siver e un insediamento di un anno nel territorio della Repubblica di Buriazia (insediamento di Sivers - da 0,1 a 73,7 tonnellate all'anno, e un accordo di un anno - da 1,2 a 122,3 tonnellate all'anno).

La standardizzazione delle materie prime è stata effettuata, i progetti FS sono stati sviluppati - "Sivers Wormwood Herbal" e "Wormwood One-Year Grass".

Il lavoro è stato condotto nell'ambito di progetti di ricerca: RFBR: No. 08-04-90202-Monga "Studio dei modelli biogenetici della biosintesi di composti biologicamente attivi di piante endemiche dell'Asia centrale" (2008-2009), n. 08-04-9803 7-rsibirya e

La composizione chimica delle piante come indicatore dello stato degli ecosistemi della regione del Baikal "(2008-2010); progetto di integrazione interdisciplinare №93 "Sviluppo della ricerca nel campo della chimica medica e della farmacologia come base scientifica per lo sviluppo di farmaci domestici"; un progetto congiunto con l'Accademia delle scienze della Mongolia "Ottenere nuove forme lipo-e nanosomiali di droghe usando materie prime naturali"; RFBR: № 10-03-16001-mobzros "Mobilità di giovani scienziati" (2010), №11-03-90705-lavoro scientifico di massa (formazione) di giovani scienziati russi nelle principali organizzazioni scientifiche della Federazione Russa 2011 (2011).

Per la difesa sono presi:

• i risultati dello studio della struttura anatomica, delle scorte, dei criteri di autenticità di Sivers e di P., in crescita in Buriazia;

• risultati di uno studio chimico di sostanze biologicamente attive e della loro dinamica stagionale dell'accumulo;

• risultati di studi sulla standardizzazione della parte fuori terra di Sivers p. E p. Un anno.